9种无公害杀菌剂对杨树烂皮病菌的室内毒力测定
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摘要：利用菌丝生长速率法和孢子萌发抑制法，测定了9种杀菌剂对污黑腐皮壳菌（Valsa sordida）的毒力，其中32.5%苯甲+醚菌酯和25%苯醚甲环唑对菌丝生长和孢子萌发均有较强的抑制作用，可以作为防治杨树烂皮病的备选药剂。
关键词：杨树烂皮病；无公害杀菌剂；毒力测定
杨树（Populus spp）是世界广泛栽植的树种。杨树以其适应性广、生长快等特点作为“三北”防护林及用材林的先锋树种，在环保和绿化工程中也占有重要地位。杨树属于速生树种，易发多种病害。杨树烂皮病（Valsa sordida）是杨树主要病害，严重时可造成杨树大面积死亡。引起杨树烂皮病的病原为子囊菌亚门的污黑腐皮壳菌（Valsa sordida），目前对杨树烂皮病的研究主要集中在发病规律、发病主导因素、发病机制以及防治技术方面。本文主要是针对杨树烂皮病菌的高效无公害农药品种进行筛选。
1 材料和方法
1.1供试菌株和药剂
1.1.1病原菌株。供试病原菌杨树烂皮病菌污黑腐皮壳菌（Valsa sordida Nit）分离自黑龙江省牡丹江海林林业局奋斗林场杨树人工林，4℃保存于PDA斜面。
1.1.2供试药剂。选用9种无公害农药进行毒力测定，具体名称种类、剂型及来源见表1。
1.2试验方法
1.2.1菌丝生长抑制法。采用直接添加法，用无菌水将杀菌剂分别配制成100、200、500、1000、2000、3000、5000、8000倍8个浓度梯度，倒入直径为9cm的培养皿制成带药平板培养基，进行抑菌测定，以无菌水作空白对照。在培养好的污黑腐皮壳菌（Valsa sordida）菌落边缘用0.5cm打孔器切取菌丝块，分别移到混有供试农药的PDA平板培养基上，每处理3个重复。在25℃恒温培养箱培养48h后，采用十字交叉法测量污黑腐皮壳菌（Valsa sordida）菌落直径，计算菌落直径平均值和菌丝生长抑制率。
菌丝生长抑制率（%）=[1-（处理菌落直径-菌饼直径）/（对照菌落直径-菌饼直径）]×100%）
1.2.2孢子萌发抑制法。用无菌水冲洗培养好的污黑腐皮壳菌（Valsa sordida）菌落平板，收集孢子，计数后稀释到一定浓度，配制成孢子悬浮液。采用悬滴法测定9种杀菌剂不同浓度梯度对污黑腐皮壳菌（Valsa sordida）孢子萌发的影响，使用的药物浓度梯度同上，分别取待测农药（含2%葡萄糖）及病原孢子悬浮液各20μL滴于载玻片上，混合，将载玻片置于保湿器中，置于25℃恒温箱中培养，以2%葡萄糖溶液与污黑腐皮壳菌（Valsa sordidz）孢子液的混合作对照，每处理3个重复，24h后镜检污黑腐皮壳菌（Valsa sordida）分生孢子的萌发率，每个梯度镜检10个视野，将结果累加。
孢子萌发抑制率（%）=（1-处理孢子萌发数/对照孢子萌发数）×100%
1.3数据统计分析
采用DPS统计软件和Excel软件对测定数据进行处理和计算，计算回归方程和菌丝生长、孢子萌发的抑制中浓度（EC50）、机率值与浓度对数之间回归的相关系数r值，比较不同杀菌剂对污黑腐皮壳菌（Valsa sordida）的抑制作用。
2 结果与分析
2.1杀菌剂对杨树烂皮病菌菌丝生长的抑制作用
9种杀菌剂对污黑腐皮壳菌（Valsa sordida）的菌丝生长均具有一定的抑制作用。对病菌抑制的EC50值，25%苯醚甲环唑效果最好，对病原菌的抑制的EC50值为0.0538mg·L-1；50%戊唑醇次之，其它依次为32.5%苯甲+醚菌酯、25%醚菌酯、25%吡唑醚菌酯、50%嘧菌环胺、50%异菌脲、80%多菌灵85%代森锰锌。
2.2不同药剂对杨树烂皮病菌孢子萌发的抑制作用
9种杀菌剂对污黑腐皮壳菌（Valsa sordida）分生孢子的萌发均具有一定的抑制作用。其中，对孢子萌发抑制的EC50值，25%苯醚甲环唑效果最好，对分生孢子萌发抑制的EC50值为0.0398mg·L-1，32.5%苯甲+醚菌酯次之；其它依次为25%醚菌酯、50%嘧菌环胺、25%吡唑醚菌酯、50%戊唑醇、50%异菌脲、85%代森锰锌和80%多菌灵。
3 结论
本文重点研究了9种高效无公害杀菌剂对污黑腐皮壳菌（Valsa sordida）的室内毒力测定，测定对菌丝生长和孢子萌发的抑制作用，建立毒力回归方程并计算了对菌丝生长和孢子萌发抑制作用的EC50值。通过比较排序，苯醚甲环唑和醚菌酯等新型杀菌剂表现了较强的抑菌作用，可以作为防治杨树烂皮病的替代药品。
（责任编辑 张芝）